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理化性质

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稳定同位素检测

C/N/S/H/O稳定同位素检测

稳定同位素检测

稳定性同位素是天然存在于生物体内的不具有放射性的一类同位素,其原子核结构是稳定的,不会自发地放出射线而使核结构发生改变,如碳-13 (13C)、氮-15 (15N)、硫-34(34S)、氢-2(D)、氧- 18(18O)等。

稳定同位素示踪技术主要是利用稳定同位素及其化合物的特性来展开。在自然界中,稳定同位素及其化合物与相应的普通元素及其化合物之间的化学性质和生物性质是相同的,只是具有不同的核物理性质,可以被区别检测,因此,可以用稳定同位素作为示踪原子,合成标记化合物(如标记氨基酸、标记药物、标记蛋白质等)来代替相应的非标记化合物。利用标记与非标记化合物的不同特性,通过质谱分析仪器来测定稳定同位素反应前后的位置及数量变化,从而阐明反应的机制和途径。

1、检测指标

稳定同位素含量的检测对研究环境变化、植物生长、代谢作用等方面具有重要意义。多米诺生物针对不同样品,采取稳定同位素质谱仪进行分析,减少了人为误差,保证了分析精度,检测样品从自然丰度到示踪样品皆可。

测试项目样品类型样品要求
碳同位素δ13C
 
植物(含树轮)0.1g100目
动物组织0.1g100目
土壤、沉积物0.1g200目
氮同位素δ15N植物(不含树轮样品)0.2g100目
动物组织0.2g100目
土壤、沉积物、树轮样品0.5g200目
硫同位素δ34S动、植物0.5g100目
土壤、沉积物1.0g200目
氢同位素δD植物-水分1g非绿色
植物-有机质0.2g100目
动物组织-水分1g冰冻
动物组织-有机质0.2g100目
氧同位素δ18O植物-水分1g非绿色
植物-有机质0.2g100目
动物组织-水分1g冰冻
动物组织-有机质0.2g100目

2、样品准备

(1)植物样品

采集植物样品,一般应采集光合活性强的阳生叶片,除非研究目的需要一般应尽量避免采集新生和衰老叶片,植物叶片样品采集后应尽快于70℃左右烘干,研磨过100目筛子,用小离心管或小样品瓶分装保存。

(2)土壤样品

采集土壤样品时,则应根据具体情况取不同深度的样品,浅表层土壤尽量划分得细些,如0 cm~2 cm,2 cm~5 cm,5 cm~10 cm等。因最表层土壤容易受到人类和生物活动的干扰,所以一般表土样品采集地表下面2 cm~3 cm的土壤,此层土壤中的有机质组分经过了长时间的分解,已达到了稳定。土壤样品采集后一般自然风干即可,也可用常规烘箱在70℃左右烘干。

(3)动物样品

动物活体放于封口袋中,带回实验室,用蒸馏水冲洗干净。一般动物(如鼠、鸡、鸭、牛、羊、猪等)取肌肉组织5-10克鲜重。昆虫动物根据大小取完整个体2-10个(能达到0.05-0.5克干重)。底栖息动物:蟹类动物选加壳宽约为2~3cm的个体5~6只,取其肌肉组成一个混合样;腹足类动物挑取大小相近的个体10~15只,取其软组织组成一个混合物。所有样品冷冻干燥(48~72 h)或60~80°C下烘干48-72小时,研磨过100目筛子,用小离心管或小样品瓶分装保存。昆虫样品一般不好研磨,可用剪刀剪碎即可。

(4)水样品

采集大气降水(降雨或降雪)时,应在降水发生期间直接采集,需要时可使用雨量桶,采集时和存储期间应注意避免水分蒸发。采集土壤水时,最好是采集根系较集中的土层,也可以采集土壤剖面,浅层土壤采集则要注意不要采集暴露在空气中的表层土壤,最好是采集表层2 cm以下的土壤。在无法直接采集到地下水的情况下,可通过采集深层土壤水、泉水或井水来代替。所有采集的水样品瓶都需要立即用不透水薄膜密封。土壤水样品冰冻(-20℃左右)保存,而其他液体水样品应在低温(3℃~4℃左右)保存。

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