饲料概略养分测定方法

一百多年来，人们一直沿用德国Weende试验站的汉尼伯格（Hanneberg）和司徒门（Stohman）两位科学家所创立的方法来分析饲料，这种方法称为Weende饲料分析体系，也就是饲料常规成分分析体系，亦称饲料近似成分分析或饲料概略养分分析（Feed Proximate Analysis）。此法可测定饲料中六种概略养分，即水分、粗蛋白CP、粗脂肪EE、粗纤维CF、粗灰分ASH、无氮浸出物NFE的含量。   概略养分测定的饲料中营养物质得到的一般不是单纯某一化学成分的含量，而是性质性质相同或相似的多种成分的混合物。

1.水分测定

1.1测定原理

  含于动植物细胞间，与细胞结合不紧密、容易挥发的水，称游离水或自由水；而与细胞内胶体物质紧密结合在一起、难以挥发的水，称结合水或束缚水。构成动植物体的这两种水分之和，称为总水分。

1.2测定方法

  将新鲜饲料样品切细，放置于饲料盘中，在60—70C烘箱中烘3—4小时，取出在空气中冷却30min，在同样烘干1h，取出，待两次称重相差小于0.05g时，所失重量即为游离水，此时样品变为风干样。

  测定游离水后的饲料或经自然风干的饲料，放入称量皿中，在105士2℃烘箱内烘干2—3h后取出，放入干燥器中冷却30min，再重复烘干1h，待两次称重相差小于0.002g时，即为恒重，失去的重量为结合水。

2.粗灰分(Ash)

2.1测定原理

  粗灰分是饲料、动物组织和动物排泄物样品在550—600℃高温炉中将所有的有机物质全部氧化后剩余的残渣。主要成分为矿物质氧化物或盐类等无机物质，有时还含有少量的泥沙。

2.2测定方法

(1）将坩埚和盖一起放入高温炉中，于550士2 0℃下灼烧30min,取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器中冷却30min，称重。再重复灼烧，冷却、称重，直至两次称重质量之差小于0.0005g为恒重。

(2）在已知质量的坩埚中称取2—5g试样（灰分质量应在0.05g以上）,在电炉上低温炭化至无烟为止。

(3）炭化后将坩埚移入高温炉中,在550 士20C下灼烧3h，取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器中冷却30min，称重。再同样灼烧1h，冷却、称重，直至2次称重质量之差小于0.001g为恒重。

3.粗蛋白质(CP)

3.1测定原理  各种饲料的有机物质在催化剂(如硫酸铜或硒粉)的帮助下，用浓硫酸进行消化，使蛋白质和氨态氮（一定条件下也包括硝酸态氮）都转变成氨气，并被浓硫酸吸收变为硫酸铵;而非含氮物质，则以二氧化碳、水、二氧化硫的气体状态逸出。然后消化液在强碱的作用下进行蒸馏，释放出氨气，通过蒸馏，氨气随水蒸气顺着冷凝管流入硼酸吸收液中，并与之结合为硼酸胺。接着以甲基红—溴甲酚绿作为混合指示剂，用盐酸标准滴定溶液滴定，求出氮的含量，再乘以一定的换算系数(通常用6.25），得出样品中蛋白质的含量。3.2测定方法(1）试样的消化  称取0.5—1g试样，准确至0.0002g，放入开始烧瓶或消化管中，加入硫酸铜0.4g，无水硫酸钾6g,与试样混合均匀，再加浓硫酸10ml和两粒玻璃珠。把凯氏烧瓶或消化管放在通风橱内的电炉或消煮炉上小心加热，待样品焦化，泡沫消失，再加大火力，至溶液澄清后，再加热15min。试剂空白测定:另取凯氏烧瓶或消化管一个,不加试样，重复以上操作。

(2）氨的蒸馏

(3）滴定

(4）空白测定

(5）测定步骤检验

4.粗脂肪(EE)
4.1测定原理

  粗脂肪是饲料、动物组织、动物排泄物中脂溶性物质的总称。常规饲料分析中，通常是将试样放于特制的仪器中，用脂溶性溶剂（乙醚、石油醚、氯仿等）反复抽提，从而把脂肪抽提出来。粗脂肪中除真脂肪外，还含有其他溶于乙醚的有机物质，如类脂、叶绿素、胡萝卜素、蜡及脂溶性维生素等物质，故称粗脂肪或乙醚浸出物。

4.2测定方法

(1)打开脂肪测定仪恒温加热装置，控制工作温度为75℃。

(2）称取2g左右的样品（准确至0.0002g） ,放入滤纸桶中烘干。

(3）用套筒夹将滤纸桶装入浸提冷凝管

(4）称量浸提杯的质量，然后加入约50ml无水乙醚。放于仪器加热板上，扳下冷凝管提升机构使浸提杯与冷凝管连接好。

(5）接通冷凝水，将滤纸桶置于“沸腾”位置。

(6）无水乙醚沸腾15或30min（依样品含油量而异）后，将滤纸桶提升到“冲洗”位置，冲洗30或45min。

(7）冲洗结束后，关闭冷凝管旋塞阀，回收乙醚。

(8）松开提升机构，取下浸提杯，放入烘箱烘干，并在干燥器中冷却浸提杯，称重。

5.粗纤维(CF)
5.1测定原理  粗纤维是植物细胞壁的主要成分，包括纤维素、半纤维素、木质素及角质等成分。乡维素是高分子化合物，不溶于水和任何有机浴剂。在稀酸和稀碱中也相当稳定，但与硫酸或盐酸共热时可水解为a 一葡萄糖。将饲料样品经1.25%稀酸、稀碱各煮沸30min后，再用乙醇除去醇可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量称为粗纤维的量。它不是一个化学实体，只是在公认强制规定的条件下，测出的概略养分。5.2测定方法

(1）称取1g左石试样，准确至0.0002g，装入已知质量的滤袋，封口，平放于样品架上。

(2）将样品架置于分析仪的消煮容器中，加入1900—2000ml室温硫酸溶液，密封，酸消化45min 。

(3）排废液，加1900-2000ml热水，清洗3—5min。重复2次。

(4）加入1900—2000ml室温碱溶液，密封，碱消化45min 。重复（3）操作。

(5）将样品取出，将滤袋中水分轻轻挤掉。然后将滤袋置于干净烧杯中，加入丙酮，浸没滤袋，2—3分钟后取出，轻轻挤掉丙酮，于通风橱内凉干。

(6）105℃烘箱中烘干2—3h，冷却，称重。

(7）将滤袋置于已知质量的坩埚中，在电炉上炭化至无烟。然后转移到高温电炉中550C灰化2h。冷却，称重。

6.无氮浸出物(NFE)
  无氮浸出物主要指的是易于被动物利用的淀粉、双糖、单糖等可溶性碳水化合物。常用饲料中无氮浸出物含量一般在50%以上，特别是植物籽实和块根(块根饲料中含量高达70-85%）。饲料中无氮浸出物含量高，适口性好，消化率高，是动物能量的主要来源。但动物性饲料中无氮浸出物含量很少。另外，还包含水溶性维生素等其他成分。常规饲料分析不能直接分析饲料中无氮浸出物，而是通过相差计算法而求得。

  无氮浸出物由下式计算而来:
 

  无氮浸出物W(NFE)=100%-(W(H2O)+W(Ash)+W(CP)+W(EE)+W(CF))%

  概略养分分析方案中的粗纤维和无氮浸出物是碳水化合物的两个组成部分，也是宠物的主要能量来源。

  总体而言，该分析方法简单，不需要昂贵的仪器，分析成本低。但是也存在一些局限，比如它仅仅是饲料营养价值评定的一个指示，它不能精确表示饲料所含的营养成分。同时，在常规饲料分析中没有考虑营养成分间的定性问题，而这些营养成分对动物的生理作用和营养功能却有着不同的重要性。