蛋白鉴定

利用LC-MS/MS技术对单一纯化蛋白样品或单一胶条（SDS-PAGE）、IP、Co-IP溶液等样本进行蛋白鉴定。

一、实验原理

对于混合物样本，先进行SDS-PAGE分离（或IP、Co-IP、Pull-down），然后对分离后的样本或单一纯化样本进行酶解，之后通过质谱进行测定，肽段在质谱仪中离子化后，会带上一定量的电荷，通过检测器分析，可得到各肽段的质荷比（m/z），为获得肽段的序列信息，质谱仪会对肽段进行破碎，再次分析，获得二级质谱，检索软件根据二级质谱信息与相应的数据库比对，结合匹配度打分及错配过滤，可得到肽段的确切序列，进而拼接出各蛋白的完整序列，从而实现对蛋白的鉴定。

二、实验流程

三、送样要求

1. SDS-PAGE条带，考染、银染（质谱兼容）条带清晰可见。

2. 蛋白质溶液（针对IP、Co-IP纯化获得的蛋白液），蛋白质总量>10μg，浓度>0.5μg/μL，缓冲液不含去污剂NP40、Triton X-100等。

3. 液体建议低温，冰袋送样。

四、结果交付

原始数据及实验报告。